Artigo Original
Chen et al
Efeitos e mecanismos da DSR na anti-hipertensão
Arq Bras Cardiol. 2017; 108(3):237-245
Introdução
A hipertensão é principal causa de doenças cardiovasculares
no mundo todo,
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resultando numa estimativa de 7,6 milhões
de mortes por ano.
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Globalmente, 40,8% da população sofre
de hipertensão, com uma taxa de conhecimento da doença de
46,5% e taxa de controle de 32,5%.
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O controle da hipertensão é
umdesafio devido aos efeitos colaterais, baixa ader ncia e eficácia
limitada das drogas anti-hipertensivas.
Os efeitos anti-hipertensivos da denervação simpática renal
por radiofrequ ncia (DSR) foram descritos pela primeira vez por
Krumet al.,
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em2009. Os estudos SymplicityHTN-1
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e Symplicity
HTN-2
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mostraram efeitos anti-hipertensivos profundos durante
um seguimento de 36 meses. Uma metanálise confirmou que o
tratamento com DSR é eficaz para hipertensão resistente,
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e se
mostrou superior ao tratamento clínico otimizado na redução
da pressão arterial (PA).
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No entanto, o estudo Symplicity HTN-3
não mostrou redução eficaz da PA em pacientes portadores de
hipertensão resistente,
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indicando que apenas uma minoria dos
pacientes era candidata a DSR.
Uma vez que os mecanismos anti-hipertensivos específicos da
DSR não são claros, as concentrações de noradrenalina (NA) são
um índice da atividade neural simpática em humanos, a qual está
positivamente correlacionada com a PA. A DSR pode reduzir a
NA que contribui para baixar a PA, embora o efeito da DSR sobre
a NA seja inconsistente.
10,11
Os níveis variáveis de NA após DSR
podem ser decorrentes da atividade de tirosina hidroxilase (TH),
renalase, catecol-o-metil transferase (COMT) e transportador de
noradrenalina (TNA), que são as enzimas associadas à síntese e
metabolismo da NA. Por outro lado, o eixo da enzima conversora
de angiotensina 2 (ECA2)/angiotensina (Ang)-(1-7)/Mas constitui
uma alternativa ao sistema renina-angiotensina (SRA) e representa
um mecanismo intrínseco na indução de ações vasoprotetoras
através da contrarregulação do eixo ECA/AngII/AT1R, induzindo,
assim, muitos efeitos benéficos nas doenças cardiovasculares
(DCVs), estando inversamente relacionado à PA,
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e exibindo
proteção cardiovascular e renal. Assim, o objetivo deste estudo
foi determinar o efeito da DSR sobre a NA renal e as alterações
nas enzimas relacionadas à NA (TH, renalase, COMT e TNA).
Além disso, investigamos os níveis renais do eixo ECA2 – Ang-(1-
7) - Mas após DSR e discutimos os mecanismos anti-hipertensivos
potenciais da DSR.
Métodos
Preparo dos animais
Todos os procedimentos relativos ao uso e cuidados dos
animais foram aprovados pelo Comit de Ética do Central South
University. Cães beagle (n=28, 10 a 12meses de idade, pesando
11-12kg) foram divididos aleatoriamente em um grupo modelo
de hipertensão (n = 22) e um grupo controle (n = 6). Ao longo
do estudo, os cães foram alimentados comdieta rica em gordura
(foram acrescentados 0,3 a 0,4 kg de toucinho à dieta normal
de 250g/dia) no grupo modelo, e com dieta normal (250g/dia,
incluindo 23%de proteína, 11%de gordura, 4,9%de fibras, 10%
de água, 1-3% de cálcio,0,8% de fósforo, 0,29% de metionina,
11000UI de vitamina A/kg, 1000UI de vitamina D3 / kg e 500
UI de vitamina E / kg) no grupo controle. Após 3 meses de dieta
rica em gordura, 20 cães atingiram cerca de 50%de aumento no
peso corporal, sendo a ingesta de gordura reduzida a umnível de
manutenção. Esse modelo de obesidade canina após dieta rica
em gordura mimetiza de perto as alterações cardiovasculares,
renais, hormonais e metabólicas observadas em indivíduos
humanos obesos. O grupo hipertenso foi dividido em um grupo
cirurgia (n = 10) e um grupo cirurgia simulada (n = 10). Tr s
animais foram excluídos pelos seguintes motivos: hematoma
retroperitoneal por puntura da artéria femoral (n=1) e morte
decorrente da anestesia (n=2). O grupo cirurgia (n = 9) foi
tratado com denervação simpática renal por radiofrequ ncia,
enquanto que o grupo cirurgia simulada (n=8) e o grupo controle
(n = 6) foram tratados com arteriografia renal. Seis meses após
DSR, sacrificamos os cães beagle sob anestesia profunda por
injeção intramuscular de pentobarbital sódico (30-35 mg/kg).
Denervação simpática renal por radiofrequência
A cirurgia foi realizada a temperatura ambiente, com jejum
prévio de 24 horas e após anestesia com injeção intramuscular
de pentobarbital sódico (30-35 mg/kg). Após a anestesia
bem-sucedida, os cães eram colocados na posição supina
sobre a mesa cirúrgica e, em seguida, era feita antissepsia de
rotina da artéria femoral direita. Inseria-se um cateter através
da artéria femoral para monitorar a PA e a arteriografia renal.
O cateter de ablação por radiofrequ ncia era inserido na artéria
femoral até a artéria renal e conectado ao aparelho de ablação por
radiofrequ ncia (IBI, St. Jude Medical, Inc., St. Paul, MN, EUA).
De 3 a 4 locais de ablação eram selecionados para cada local,
sendo realizada ablação local em forma espiral (cateter de ablação
por radiofrequ ncia 5F IBI, St. Jude Medical). Cada ponto era
submetido a ablaçãodurante 120 segundos, com limite de energia
de 8W, até que a temperatura do tumor atingisse 55°C. Realizava-
se arteriografia renal imediatamente após a cirurgia, pressão sobre
o local de puntura durante 15 a 30 minutos, curativo e fixação.
Métodos analíticos
Opeso corporal foimedidopor balança eletr nica. Foi utilizado
o BP-2010E (Softron, China), que é um aparelho de medida de
pressão arterial de cauda, para medir PAS, PAD e PAM. Foram
medidas a concentração plasmática e tecidual renal de NA
através de cromotografia líquida de alta efici ncia com detecção
eletroquímica (CLAE).Os níveis deECA2emRNAMas renais foram
medidos através de PCR em tempo real. A Ang-(1-7) (Cusabio,
China) renal foi estimada por ELISA. Os níveis de TH, renalase,
COMT, TNA, ECA2 e expressão da proteína Mas no tecido renal
foram medidos por Western blot e imuno-histoquímica.
CLAE
Amostras de NA em meio de liberação acidificado, perfusato
e superperfusato foram identificadas e quantificadas por CLAE. O
sistema consiste de um sistema de liberação de solvente Varian
Pro-Star e um auto-amostrador modelo 9090 (Varian, Walnut
Creek, CA), acoplado a uma coluna C18 e a um detector ESA
Coulochem II. As separações foram feitas forma isocrática através
de uma fasemóvel filtrada e desgaseificada consistindo de 12%de
metanol, 0,1Mde fosfato sódico, 0,2mMde octil sulfato sódico e
0,1 mM de EDTA, ajustada a um pH de 2.8 com ácido fosfórico.
O sistema de cromotografia líquida de alta pressão é acoplado a
umcomputador, ondeos cromatogramas sãogravados e analisados
através do software de estação de trabalho Varian Star.
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